DNA microarray genotyping of N-acetyltransferase 2 polymorphism using carbodiimide as the linker for assessment of isoniazid hepatotoxicity.

La isoniazida de fármaco antituberculoso (INH) se acetila por N-acetiltransferasa 2 (NAT2), y la frecuencia de la hepatotoxicidad inducida por INH se determina por el genotipo NAT2. NAT2 genotipado no se realiza de forma rutinaria en los laboratorios de hospitales debido a su dificultad. El uso de microarrays para la investigación se está convirtiendo en común y sus expectativas de aplicación clínica está aumentando. En este estudio, hemos tratado de desarrollar un método más fácil de NAT2 genotipificación para el uso clínico. Hemos ideado una novela de microarrays de ADN basados ​​en oligonucleótidos para la determinación del genotipo NAT2 usando una técnica recientemente desarrollada para la fijación de las sondas de oligonucleótidos a portaobjetos de vidrio recubiertos con poli-carbodiimida, que logra una señal de hibridación más fuerte y mejor especificidad que las diapositivas aminosilane recubierta más ampliamente utilizados. Para evaluar la validez de este microarray, cuatro clones con mutaciones NAT2 y el ADN de 42 pacientes con tuberculosis fueron investigados por el método de microarrays y por análisis de polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción. Los resultados de la genotipificación por estos dos métodos estaban de acuerdo. Análisis de la relación entre el fenotipo determinado por el NAT2 de microarrays de ADN y el riesgo de la hepatotoxicidad inducida por INH revelado que acetiladores lentos tenían un riesgo significativamente mayor. Estos hallazgos sugieren que nuestro microarray puede ser clínicamente útil para predecir reacciones a fármacos a INH.