Variation in dengue virus plaque reduction neutralization testing: systematic review and pooled analysis.

ANTECEDENTES: La reducción de la placa de neutralización (PRNT) sigue siendo el estándar de oro para la detección serológica de la respuesta inmune a virus dengue (DENV). Aunque el concepto básico de la PRNT permanece constante, esta prueba ha evolucionado en varios laboratorios, introducir variaciones en materiales y métodos. A pesar de la importancia de la comparabilidad de laboratorio a laboratorio en el desarrollo de vacunas DENV, los efectos de diferentes técnicas de PRNT sobre los resultados del ensayo, particularmente el uso de cepas de dengue diferentes dentro de un serotipo, no se han caracterizado completamente. MÉTODOS: Se realizó una revisión sistemática y un análisis conjunto de la literatura publicada informes a nivel individual los títulos de PRNT para identificar los factores asociados con la heterogeneidad en los resultados de PRNT y la variación en comparación entre las cepas de los serotipos DENV y entre los artículos que utilizan modelos jerárquicos. Resultados de la búsqueda bibliográfica y criterios de selección identificaron 8 ensayos de vacunas y 25 estudios de exposición naturales de presentación de informes a partir de 4.411 títulos de 605 personas con 4 diferentes porcentajes de neutralización, 3 líneas celulares, las concentraciones de 12 y cepas de virus 51. De 1.057 títulos de la exposición DENV principal, los títulos al serotipo exposición fueron sistemáticamente mayores que los títulos contra serotipos no-exposición. En contraste, los títulos de las exposiciones secundarias DENV (n = 628) demostraron títulos altos a los serotipos de exposición y no exposición. Además, los títulos de PRNT de cepas diferentes dentro de un serotipo variado sustancialmente. Un análisis combinado de 1.689 títulos demostrado elección cepa representó el 8,04% (90% intervalo de credibilidad [CRI]: 3,05%, 15,7%) de entre-título variación después de ajustar por la exposición secundaria, el tiempo desde la exposición porcentaje DENV, la vacunación y la neutralización. Las diferencias entre los artículos (un indicador de las diferencias entre laboratorios) representaron el 50,7% (90% CRI: 30,8%, 71,6%) de entre-título de la varianza. CONCLUSIONES: vacunas candidatas prometedoras surgen de la falta de pruebas estandarizadas de diagnóstico entre los laboratorios de investigación y hacer inferencias imparciales sobre protección inducida por la vacuna difícil. Claramente definidos, reactivos de referencia ampliamente accesibles, pruebas de aptitud o algoritmos para ajustar las diferencias de protocolo sería un primer paso útil en la mejora de la comparabilidad PRNT dengue y control de calidad.